骨髓间充质干细胞的肌源性诱导分化及转染VEGF基因的表达

被引：12

作者：

盛小刚

冯建章

吴书林

靳立军

余细勇

张斌

机构：

[1] 广东省心血管病研究所心内科,广东省心血管病研究所心内科,广东省心血管病研究所心内科,广东省心血管病研究所心内科,广东省心血管病研究所中心实验室,广东省心血管病研究所心内科广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州

来源：

第一军医大学学报 | 2004年 / 03期

关键词：

基因表达; 动物,转基因/免疫学; 骨髓间充质干细胞; 肌源性细胞; 血管内皮生长因子;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.2 [人体细胞学];

学科分类号：

摘要：

目的体外诱导兔骨髓间充质干细胞向肌源性细胞分化,并观察血管内皮生长因子AdTrackCMV-hVEGF165真核表达质粒转染骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)后的表达。方法将20只兔随机分为对照组和实验组,从骨髓液中分离MSCs,对照组以低糖DMEM培养,实验组加用5-氮胞苷(10 mmol/L)诱导培养,第28天进行肌钙蛋白I免疫组化染色。另构建AdTrackCMV-hVEGF165真核表达质粒,通过脂质体转染对照组MSCs,用Northern blotting和Western blotting鉴定血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并用ELISA法测定培养上清液中VEGF的浓度。结果成功分离培养出兔MSCs,实验组经5-氮胞苷诱导后MSCs向肌源性细胞分化,肌钙蛋白I免疫组化染色阳性。成功构建AdTrackCMV-hVEGF165真核表达质粒并通过脂质体转染MSCs,Northern blotting示转染的MSCs VEGF165表达信号明显强于未转染细胞,Western blotting 示转染VEGF165基因的MSC表达VEGF,ELISA法测定培养上清液中VEGF的浓度在转染后第3天(1 011 pg/ml)和第5天(1 027 pg/ml)达高峰,此后逐渐下降,但至第13天(349 pg/ml)仍显著高于空白对照(116 pg/ml)和pAdTrackCMV组(125 pg/ml),P<0.01。结论兔骨髓间充质干细胞可在体外向肌源性细胞分化,转染VEGF基因可表达VEGF,有望将干细胞移植和基因治

引用

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共 4 条

[1] 诱导的人骨髓间充质干细胞在裸鼠体内生成软骨的实验研究 [J].