成人胰腺干细胞转分化为胰岛的研究

目的　通过对成人胰腺干细胞转分化为胰岛过程的研究以便更深入了解及改进胰腺干细胞分离、培养、鉴定方法。　方法　成人胰腺组织经胶原酶消化后 ,用密度梯度离心法将胰腺外分泌细胞、导管上皮细胞和胰岛分离、纯化 ,导管上皮细胞即具有转分化潜能的干细胞 ,在体外先后以CMRL1 0 66和无血清DMEM/F1 2培养液共培养 2 7d ,在培养的不同时间点取样本于光镜和电镜下观察细胞形态学变化及干细胞特异性转录基因PDX 1 ,CK 1 9蛋白等单抗的免疫组化染色 ,并测定培养液中的淀粉酶和胰岛素含量。　结果　上述方法可获得大量以往在胰岛分离时丢弃的胰腺导管上皮细胞。经体外一定条件的培养后 ,第 1天即可见PDX 1 ,CK 1 9阳性细胞 ,胰腺导管上皮细胞迅速分裂增殖并转变为有分化能力的干细胞继而转分化为三维结构的胰岛细胞。培养 2 7d后 ,平均每克胰腺组织可生成 760个胰岛。　结论　成人胰腺的导管上皮具有干细胞潜能并可在体外转分化为大量具有内分泌功能的胰岛 ,用此方法获得大量的胰岛可能为克服胰岛移植的供体短缺提供一条新的途径