酶切图谱及序列分析虫体ITS2鉴别中国的片形吸虫

被引:17
作者
黄维义
何波
机构
[1] 广西大学
关键词
片形吸虫; 序列分析;
D O I
暂无
中图分类号
S852.735 [];
学科分类号
摘要
提取我国广西、四川、黑龙江、甘肃等地及法国的片形吸虫的总 DNA,用 PCR扩增完整的 ITS- 2。对得到的 PCR产物用限制性内切酶 Hsp92 ,Rca 进行酶切和 RFL P技术分析。并对 ITS- 2 PCR产物进行双向测序。以便确定国内片形吸虫种内及种间 ITS- 2的特点和序列变异的水平。结果显示 :广西、四川、黑龙江、法国等地的样品通过 PCR均扩增到约 5 5 0 bp的 ITS- 2目标片段。Hsp92 ,Rcal可区别不同种的片形吸虫。对PCR产物的序列分析结果表明片形吸虫 ITS- 2全长均为 36 2 bp,同种内 ITS- 2序列无变异 ,不同种间 ITS- 2序列存在 5~ 6个碱基差异 ,变异率约为 2 .8%。对各地区片形吸虫 ITS- 2的 PCR— RFL P分析与对 PCR产物的 DNA序列分析一致证明 ,来自四川的样品和法国样品同属肝片形吸虫 F.hepatica;广西样品属大片形吸虫 F.gigantica;黑龙江的样品为中间型片形吸虫。本研究首次从分子水平上证实我国除有肝片形吸虫、大片形吸虫外 ,还存在中间型的片形吸虫
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