固定化烟草核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶的解离及重组作用

本文将共价偶联于CNBr活化的Sepharose 4B上的烟草核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶用不同浓度尿素处理后,发现2—2.5mol/L尿素可将小亚单位解离下来而大亚单位仍偶联在载体上。3mol/L以上尿素可将大亚单位8聚体,L8进一步解离为单体。因此,酶是通过大亚单位上的ε-氨基与载体相偶联的。小亚单位的解离量与酶活性的下降呈线性相关。将解离酶的尿素浓度稀释至0.5mol/L,解离的小亚单位几乎全部结合到残缺小亚单位的固相酶上,酶的活性也接近全部恢复。重组小亚单位量与酶活性增加亦呈线性相关。结果表明:除大亚单位外,小亚单位对维持酶的活性也有重要的作用。