白术提取物对IEC-6细胞迁移过程多胺信号通路钙离子调控的影响

目的:考察白术提取物(AMK)对小肠上皮IEC-6细胞迁移过程多胺介导信号通路中钙离子调控的影响,探讨白术促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法:在刀片划痕法细胞迁移模型上观察白术提取物对细胞迁移的影响;流式细胞仪检测细胞质游离钙离子水平([Ca2+]cyt);荧光定量PCR法检测钙通道蛋白瞬时受体电位阳离子通道1(TRPC1)mRNA表达;Western Blot法检测TRPC1蛋白表达。结果:①白术提取物(100mg/L和200mg/L,下同)能促进IEC-6细胞迁移、增加[Ca2+]cyt、提高TRPC1 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。②白术提取物可逆转多胺合成抑制剂(DFMO)所致的细胞迁移抑制、[Ca2+]cyt降低、TRPC1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。③若去除了细胞外的Ca2+(使用无Ca2+培养液),则不但空白对照组出现显著的细胞迁移抑制(P<0.01),且白术提取物促进细胞迁移的作用程度也明显弱于使用含Ca2+培养液时(P<0.01)。结论:白术提取物促进小肠上皮细胞迁移的作用与影响多胺介导信号通路中钙离子调控有关,主要作用途径可能是通过促进细胞外Ca2+内流而增加[Ca2+]cyt,另一较弱的作用途径可能是增加细胞内钙库释放Ca2+。