蓖麻蚕卵黄原蛋白cDNA的克隆及序列分析

本文论述了蓖麻蚕卵黄原蛋白cDNA迅速克隆化的方法。SDS-PAGE鉴定的蓖麻蚕卵黄原蛋白由大小二个亚基构成,求出的分子量大亚基为180kDa,小亚基为45kDa,从解析的蓖麻蚕卵黄原蛋白氨基酸序列推算的分子量大亚基为161.06kDa,小亚基为40.53kDa,如果考虑到翻译后的修饰,这与SDS-PAGE求出的分子量是吻合的。蓖麻蚕卵黄原蛋白cDNA是由5788pb构成,一个ORF为5337个碱基,编码了1779个氨基酸。在信号肽的15个氨基酸残基中,有12个是疏水性氨基酸残基。这与其他昆虫卵黄原蛋白信号肽区域的疏水性分析是一致的。蓖麻蚕卵黄原蛋白N-linkedglycosylationsite的分布与家蚕、柞蚕和天蚕不同,3处N-linkedglycosylationsite存在于大亚基里,2处存在于多聚丝氨酸区域上流的小亚基里。另外,我们发现在所解析的柞蚕、天蚕和蓖麻蚕卵黄原蛋白氨基酸序列的C-末端区域里DGQR、GICG功能部位及其后的6个半胱氨酸都完好地保存。