负载异体抗原对低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子诱导的树突状细胞免疫学性状的影响

目的观察低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）诱生的未成熟树突状细胞(GMlowDC)对异体抗原的摄取能力,以及负载异体抗原后细胞表型和功能的改变。方法对处于增殖期的C57BL/6小鼠单个核细胞（MNC）作氚标记亮氨酸（3H-Leu）掺入处理,制备3H-Leu标记的抗原上清液。将此抗原上清液分别与昆明小鼠GMlowDC和成熟树突状细胞（DC）孵育30、60、90 min,检测细胞每分钟放射性荧光闪烁计数（cpm）值；用流式细胞仪检测负载异体抗原前后GMlowDC表面IA/IE、CD80分子的表达情况。分离C57BL/6小鼠的T淋巴细胞,根据加入的刺激因素分组并进行同种混合淋巴细胞反应（MLR）：对照组（不加刺激因素）、GMlowDC组、GMlowDC+异体抗原组、GMlowDC+异体抗原+细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4Ig（CTLA-4Ig）组。检测各组细胞cpm值,计算刺激指数（SI）。结果加入异体抗原上清液后30、60、90 min,GMlowDC的cpm值均明显高于同时相点的成熟DC（P＜0．05或0．01）。负载异体抗原前,GMlowDC细胞表面IA/IE的表达率为（32±8）%,CD80的表达率为（25±10）%；负载后两者分别为（54±10）%、（71±18）%,均明显升高（P＜0．05或0．01）。MLR：GMlowDC+异体抗原组细胞cpm值明显高于对照组（P＜0．05）,SI＞2．0；GMlowDC组以及GMlowDC+异体抗原+CTLA-4Ig组细胞cpm值与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）,AI均＜2．0。结论GMlowDC具有较强的抗原摄取能力,负载抗原后,细胞在表型及功能上渐趋成熟。应用CTLA-4Ig可阻断其免疫应答效应,建立免疫耐受。