Toll样受体对大鼠骨髓间充质干细胞成骨的影响

被引：4

作者：

徐晓峰 ^{[1
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王晓光 ^{[1
]}

陈奇 ^{[1
]}

张志坚 ^{[2
]}

胡浪 ^{[1
]}

机构：

[1] 江苏大学附属医院骨科

[2] 江苏大学基础医学与医学技术学院

来源：

中华实验外科杂志 | 2014年 / 31卷 / 07期

关键词：

Toll样受体; 骨髓间充质干细胞; 成骨分化;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.2 [人体细胞学];

学科分类号：

100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];

摘要：

目的观察Toll样受体(TLR)不同亚型对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨的影响。方法分离纯化SD大鼠BMSCs,传代扩增。免疫荧光分析检测CD44、CD105、波动蛋白(Vimentin),流式细胞术检测CD34、CD14、CD29、CD95、CD4和人白细胞抗原(HLA)-I等标志物。将第3代细胞,随机分为空白组、TLR-3激活组和TLR-4激活组。后两组分别以聚肌胞苷酸Poly(I:C),1 mg/L)和脂多糖(LPS,10μg/L)激活。成骨诱导培养液培养。Western blot法检测I型胶原(Collagen-I)和骨钙素(Osteocalcin)的表达,并定量分析。在培养的第10、14天进行碱性磷酸酶(ALP)及茜素红染色。结果全骨髓培养法提取到BMSCs,免疫荧光显示CD44、CD105、Vimentin阳性。流式细胞术显示CD29、CD95、CD44、HLA-I阳性,CD14、CD34阴性。Collagen-I和Osteocalcin的蛋白表达量依次为,TLR-4激活组>TLR-3激活组>空白组。3组ALP染色及茜素红染色均呈阳性,TLR-3激活组染色程度最强,空白组和TLR-4染色程度无明显差异。结论 TLR-3和TLR-4均能促进大鼠BMSC向成骨细胞(OB)分化。TLR-4作用更明显。在OB矿化过程中,TLR-3起促进作用,TLR-4则起抑制作用。

引用