绿色荧光蛋白逆转录病毒载体的构建及其表达

被引:10
作者
刘德莉
胡晓洁
吴娟娟
刘伟
曹谊林
机构
[1] 上海第二医科大学第九人民医院整形外科,上海第二医科大学第九人民医院整形外科,上海第二医科大学第九人民医院整形外科,上海第二医科大学第九人民医院整形外科,上海第二医科大学第九人民医院整形外科上海第二医科大学组织工程研究中心,上海,上海第二医科大学组织工程研究中心,上海,上海第二医科大学组织工程研究中心,上海,上海第二医科大学组织工程研究中心,上海,上海第二医科大学组织工程研究中心,上海
关键词
重组逆转录病毒载体; 绿色荧光蛋白; 细胞标记;
D O I
暂无
中图分类号
Q782 [基因载体];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
目的 实现绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在组织工程化细胞中的高效、稳定、长久表达。方法 构建重组逆转录病毒表达载体RV GFP ,通过PT6 7包装细胞克隆 ,经G418筛选、扩增 ,获得大量含GFP基因的病毒液 ,并直接感染靶细胞。结果 转染细胞于 48h后 ,在荧光显微镜蓝光激发波长下 ,可发出明亮的绿色荧光 ,转染率达 2 0 %~5 0 %。感染靶细胞内GFP的有效表达可维持 2个月。结论 构建的重组逆转录病毒GFP载体 ,可作为组织工程化细胞标记 ,用于细胞动态研究 ,其方法简便、灵敏、可靠
引用
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页码:424 / 425+438 +438
页数:3
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