人血小板第4因子和P-选择素的纯化

被引：1

作者：

赵益明

许卫东

何杨

沈文红

阮长耿

机构：

[1] 苏州大学附一院江苏省血液研究所血栓室!苏州

来源：

中国血液流变学杂志 | 2001年 / 03期

关键词：

血小板因子4; P-selectin; 单克隆抗体; 亲和层析;

D O I：

暂无

中图分类号：

R341 [];

学科分类号：

摘要：

目的　用单克隆抗体亲和层析方法从人血小板破碎液中纯化血小板因子 4和P -选择素。方法　将单克隆抗体SZ - 95 -IgG和SZ - 5 1-IgG分别与溴化氰活化的Sepharose4B凝胶连接成SZ - 95 -IgG -Sepharose4B和SZ -5 1-IgG -Sepharose4B亲层析柱 ,人血小板破碎液经此亲和层析柱上样后 ,再经FPLC系统获得的所要的产品 ,产品经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其纯度 ,用点杂交鉴定其生物学活性。结果　SZ - 95 -Sepharose4B和SZ - 5 1-Seph arose4B亲和层析柱的偶联率分别 72 %和 6 8% ,每 1ml(约 1× 10 9个血小板 )血小板破碎液中可以纯化到 18μgPF4和12 μgP -selectin ,所得产品经SDS -PAGE ,在分子量约为 12kD和 140KD处各显单一的蛋白区带 ,经点杂交印迹显示产品分别与单抗SZ - 95和SZ - 5 1反应显带。结论　用单克隆抗体亲和层析柱纯化的PF4和P -selectin产品得率高、纯度高、活性好

引用

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页数：4

共 5 条

[1] 脾内免疫制备抗人血小板第4因子单克隆抗体和鉴定 [J].