HBV基因组A1846T变异对病毒复制力及核心启动子活性的上调作用研究

被引：6

作者：

江玲 ^{[1
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许智慧 ^{[2
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刘妍 ^{[2
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李晓东 ^{[2
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姚伟明 ^{[1
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李韦杰 ^{[1
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戴久增 ^{[2
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辛绍杰 ^{[2
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徐东平 ^{[2
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机构：

[1] 北京大学解放军医院教学医院病毒性肝炎研究室

[2] 解放军医院全军传染病研究所/肝衰竭诊疗与研究中心

来源：

解放军医学杂志 | 2013年 / 38卷 / 01期

关键词：

肝炎病毒,乙型; 肝功能衰竭; 突变; 启动区; DNA复制;

D O I：

暂无

中图分类号：

R512.62 [];

学科分类号：

摘要：

目的评价乙肝病毒(HBV)基因组核苷酸(nt)A1846T变异对病毒体外复制力及核心启动子(CP)转录活性的影响。方法 385例研究对象包括116例轻中度慢性乙肝(CHB-M)患者,123例重度慢性乙肝(CHB-S)患者和146例慢加急性肝衰竭(ACLF)患者。从患者血清中提取HBV DNA,PCR扩增HBV全长基因组,统计A1846T变异的发生率。挑选代表性A1846T变异株HBV全长序列克隆至pGEM-Teasy载体中,并通过定点突变获得野生型对照。BspQⅠ/ScaⅠ双酶切HBV基因组,转染HepG2细胞,检测病毒复制力和HBsAg表达水平;用PCR分别扩增含nt1846变异型和野生型的HBVCP区片段,构建pGL3-CP双荧光素酶真核报告表达载体,转染HepG2细胞,分析检测A1846T变异对荧光素酶表达的影响。结果 HBV A1846T变异发生率随疾病程度加重依次增高,CHB-M、CHB-S和ACLF患者的变异检出率分别为31.03%、42.27%和55.48%(P<0.01)。A1846T变异株的复制力、分泌的HBsAg水平和核心启动子活性较野生株分别提高了320%、28%和85%,常见的CP区A1762T/G1764A双联变异株分别较野生株提高了67%、9%和72%,A1846T变异对提高病毒复制力的影响更强。结论 A1846T变异可显著增加HBV复制力,提高HBsAg表达水平,增强启动子活性,顺式激活下游基因转录表达,提示该变异可能与慢性乙肝重症化发生机制相关。

引用

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共 5 条

[1]

Biologic properties of hepatitis B viral genomes with mutations in the precore promoter and precore open reading frame [J].