储存损伤对血小板超微结构、磷脂及聚集功能的影响

目的对保存期间血小板脂质、超微结构及功能的改变进行观察分析，探讨储存损伤对血小板的影响。方法２０名健康献血者，常规采血，经二次离心获得浓缩血小板，将每单位浓缩血小板分装成两份，分别编为甲、乙两组，每组２０个样本。甲组于２２℃水平振摇保存，分别在３天、５天时取样检测；乙组采用ＤＭＳＯ作为防冻剂，终浓度为５％，－８０℃保存，分别在１月、３月、６月时取样测定；采血当天的新鲜血小板为对照组。采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ－ＵＶ）分析血小板磷脂的变化，电镜观察血小板超微结构的改变。结果正常人新鲜血小板中四种主要磷脂：磷脂酰胆碱（ＰＣ），磷脂酰乙醇胺（ＰＥ），磷脂酰丝氨酸（ＰＳ），磷脂酰肌醇（ＰＩ）的含量依次为ＰＣ＞ＰＥ＞ＰＳ＞ＰＩ，各占总磷脂含量的３７％，２７％，１２％，７％左右。血小板在２２℃水平振摇保存３天、５天，磷脂丢失率为５．８％，３１．８％；－８０℃冷冻保存（防冻剂为ＤＭＳＯ）１～６月，磷脂丢失率约为３３～３６％左右，且不随冷冻时间延长而增加。透射电镜观察血小板超微结构，发现血小板出现激活信号，如由盘状向球形转变，伪足延伸，开放小管系统（ＯＣＳ）肿胀，储存颗粒丧失，空地形成等。血小板聚集实验显示：血小板对聚集