人角膜缘干细胞的原代培养和生物学鉴别

被引：19

作者：

崔彦

董晓光

谢立信

史伟云

机构：

[1] 山东省青岛市,山东省眼科研究所,山东省眼科研究所,山东省眼科研究所,山东省眼科研究所

来源：

眼科新进展 | 2001年 / 04期

关键词：

角膜缘; 干细胞; 细胞培养;

D O I：

10.13389/j.cnki.rao.2001.04.003

中图分类号：

R772.2 [角膜疾病];

学科分类号：

100212 [眼科学];

摘要：

目的　探讨人角膜缘干细胞 (stem cell,SC)体外培养方法并观察其生物学特性。方法　应用消化培养法对人角膜缘组织进行原代培养 ,记录其生长特性。待细胞生长至80 %汇合时 ,分别采用针对 6 4KD角蛋白的 AE5、针对一组酸性角蛋白的 AE1单克隆抗体 ,抗增殖细胞核抗原单克隆抗体 (anti- proliferating cell nuclear antigen,PCNA) ,针对5 0 KD烯醇酶特异的单克隆抗体 4G 10 .3,通过间接免疫荧光细胞化学染色对培养细胞进行鉴别。结果　人角膜缘组织应用消化培养法在 6～ 7d达到 80 %汇合状态 ,应用间接免疫细胞化学染色 ,AE1、AE5染色 ,胞浆染色阳性。 PCNA染色、细胞核染色阳性 ,4G 10 .3亦可见阳性结果。结论　应用消化培养法可成功地对人角膜缘组织进行原代培养 ,培养后细胞既可保持角膜上皮特性 ,又含有具有强增殖潜力的原始细胞 ,适合用于临床移植治疗眼表疾病

引用

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