人胃粘膜上皮细胞原代培养及其生物学鉴定

对86例成人胃粘膜组织,试用组织块培养、物理及酶学分离细胞、悬浮及贴壁等培养方法后,证明只有用酶消化分离胃上皮细胞,令其贴壁生长才是可行的培养方法。所用方法为:将胃粘膜固有膜剪碎,以胶原酶及透明质酸酶消化,制成细胞悬液后接种于涂有Ⅳ型胶原和纤粘连蛋白的塑料培养皿内,使其贴壁增殖。细胞呈多角鳞片形或略呈梭形、岛状或成片生长。显示细胞内粘蛋白的PAS法染色和角蛋白免疫组织化学染色呈阳性反应。透射电镜显示胃上皮细胞内结构的一些特征。72h3H-TdR连续标记,放射自显影结果表明:47％～63％的细胞具有合成DNA的能力。细胞在含1％胎牛血清及各种生长因子添加剂的DME/F12培养基中可存活2～3周。表皮生长因子（EGF）、大胃泌素、牛脑垂体提取物、三碘甲状腺原胺酸可刺激这些细胞的生长,而β1转化生长因子（TGF-β1）和肾上腺素则抑制细胞生长。