反义RNA对培养的肾小管上皮细胞骨调素表达的调节

被引:1
作者
陈永雄
李锦华
余学清
黄凌虹
陈伟英
吕军
范崇伦
尹培达
机构
[1] 中山医科大学附属第一医院肾内科卫生部肾脏病临床研究重点实验室!广东广州,中山医科大学附属第一医院肾内科卫生部肾脏病临床研究重点实验室!广东广州,中山医科大学附属第一医院肾内科卫生部肾脏病临床研究重点实验室!广东广州,中山医科大学附属第一医院肾
关键词
RNA,反义; 肾小管; 表皮生长因子-尿抑胃素;
D O I
暂无
中图分类号
R363 [病理生理学];
学科分类号
100104 ;
摘要
目的 :探讨骨调素 (OPN)反义RNA对培养的肾小管上皮细胞骨调素表达的影响。方法 :脂质体介导将表达OPN反义RNA的逆转录病毒重组载体转染大鼠肾小管上皮细胞系NRK5 2E细胞 ,建立稳定表达OPN反义RNA的肾小管上皮细胞克隆 ,以转染了表达OPN顺义RNA和空白逆转录病毒载体的肾小管上皮细胞克隆为对照 ,以表皮生长因子 (EGF)为刺激剂 ,通过核酸酶保护分析 (RPA) ,WesternBlot,ELISA和OPN生物活性分析检测上述克隆细胞的OPN表达。结果 :OPN反义RNA仅被反义克隆细胞表达 ,反义克隆、顺义克隆和空白克隆细胞均有OPNmRNA的表达 ,EGF能增加它们OPNmRNA的表达水平 ,但不增加反义RNA或顺义RNA的表达水平 ;加或不加EGF的反义克隆细胞和不加EGF的空白克隆细胞无OPN蛋白的表达 ,加或不加EGF的顺义克隆细胞和加EGF的空白克隆细胞有OPN蛋白的表达。结论 :OPN反义RNA能抑制肾小管上皮细胞OPNmRNA的翻译而抑制OPN蛋白的表达 ,但不抑制OPNmRNA的转录
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