抗丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3单链抗体的制备及免疫组织化学研究

被引:16
作者
钟彦伟
王松山
赵景民
成军
张玲霞
李莉
机构
[1] 解放军医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军医院病理科,解放军医院病理科,解放军医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军医院传染病研究所基因治疗研究中心,解放军医院传染病研究所基因治疗研究中心
关键词
肝炎病毒,丙型; 非结构蛋白NS3; 抗体,单链; 免疫组织化学;
D O I
暂无
中图分类号
R392-33 [免疫学技术、设备及实验方法];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的 研制抗丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS3的人源噬菌体单链抗体 ,并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法 以重组的丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3为固相抗原 ,利用亲和筛选的原理 ,从噬菌体抗体库中经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程及酶联免疫吸附试验 (ELISA)、斑点免疫杂交试验和DNA序列分析 ,获得HCVNS3的人源单链抗体 ;用该抗体与不同来源的HCVNS3抗原进行反应 ;对 10例石蜡包埋的丙型肝炎患者肝组织进行免疫组化鉴定。结果 ELISA结果表明 ,所制备的HCVNS3人源单链抗体能与不同来源的HCVNS3抗原特异性结合 (吸光度A值为1 38) ;免疫组化结果表明 ,该抗体能够特异性识别丙型肝炎患者肝组织HCVNS3抗原 ,与正常肝组织及乙型肝炎病毒 (HBV)的表面抗原均无交叉反应。结论 此法制备的单链抗体亲和性好 ,特异性强 ,且制备方法简便 ,周期短 ,可用于HCVNS3病原的检测
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[1]  
现代肝炎病毒分子生物学.[M].成军;杨守纯主编;.人民军医出版社.1997,