兔角膜内皮、上皮及基质细胞体外培养扩增的研究

目的 建立角膜上皮、基质及内皮细胞体外培养扩增的简单稳定的方法,为组织工程化角膜的构建提供种子细胞。 方法 内皮细胞与后弹力层在培养基中孵育后消化法获原代细胞,胰酶消化去除表层上皮后取角膜缘,组织块法培养角膜缘上皮细胞,基质细胞应用胶原酶消化法获原代培养,各细胞融合后胰酶消化依次传代培养。结果 原代内皮细胞4～5 d融合成单层细胞,可连续传6～7代。上皮细胞1周左右生长融合,连续传3～4代后细胞形态改变。基质细胞接种6～7 d后近融合,传代后增殖明显,可连续传10代。结论依据角膜组织特征选择合适的方法体外分离、培养角膜3种细胞成分,可获连续传代扩增的角膜细胞。