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共表达人p53、GM-CSF和B7-1基因的重组腺病毒的构建
被引：12
作者：
邱兆华
劳妙芬
吴祖泽
机构：
[1] 军事医学科学院放射医学研究所!北京,军事医学科学院放射医学研究所!北京,军事医学科学院放射医学研究所!北京
来源：
关键词：
腺病毒;
抑癌基因p53;
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子;
免疫共刺激分子B7-1;
基因治疗;
D O I：
10.13865/j.cnki.cjbmb.2001.03.012
中图分类号：
R373 [人体病毒学（致病病毒）];
学科分类号：
100103 ;
100705 ;
摘要：
为开展肿瘤的复合基因治疗 ,构建以串联方式携带人野生型p53、GM CSF和B7 1基因的重组腺病毒穿梭质粒pBB 1 0 2 .将pBB 1 0 2与腺病毒包装质粒GT40 50共转染 2 93细胞 ,通过细胞内同源重组获得重组腺病毒BB 1 0 2 .在 2 93细胞中扩增病毒 ,并通过氯化铯密度梯度超速离心纯化病毒 ,获得高滴度和高纯度的病毒 .分别经免疫组织化学分析、ELISA和流式细胞分析 ,检测BB 1 0 2介导的人野生型p53、GM CSF和B7 1基因在喉癌细胞Hep 2中的表达 .结果表明 ,BB 1 0 2能够有效地将其所携带的目的基因导入Hep 2细胞并使其在细胞中高效表达 ,表达高峰期为转染后 2～ 4d ,此后随时间递减 ,可持续 1 0d以上 .
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