目的:采用高效液相色谱法测定膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量。方法:依利特Hypersil ODS 2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A相为乙腈-甲醇(体积分数9∶1),B相为水,梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;检测波长:260 nm;柱温:室温;进样量:20μl。黄芪药材以甲醇超声提取2次,每次20 min。结果:毛蕊异黄酮苷和芒柄花素色谱峰的理论塔板数分别为50 134和25 258。回归方程分别为Y=58 924X-12 352,r=0.999 9和Y=9 237X-124 447,r=0.999 9,线性范围分别为2.022~101.1μg/ml和38.04~1 522μg/ml。方法学考察结果表明,毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的日内和日间RSD均<2.0%,最低检测限分别为0.202 2μg/ml和1.522μg/ml,加样回收率结果分别为98.34%,RSD=1.33%(n=3)和98.84%,RSD=0.12%(n=3)。测定了10批次黄芪药材的毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量。结论:该方法稳定简便,结果可靠,能够用于黄芪药材中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素含量测定的研究。