短期缺氧-复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响

目的研究短期缺氧-复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响。方法无菌条件下留取大鼠胸主动脉中膜,采用组织贴块法培养的第4～7代细胞,通过观察细胞在缺氧环境下形态学变化、死亡细胞计数等,判断缺氧刺激对体外培养平滑肌细胞活性的影响,并与正常培养箱内对照进行比较。提取细胞总RNA,用RT-PCR法,研究平滑肌细胞在缺氧及复氧后不同时间段myocardin mRNA的表达变化。结果培养细胞呈典型的"峰谷"样生长。自制缺氧装置24 h内氧分压明显降低,且pH值波动不明显。RT-PCR结果表明,与正常对照组相比,平滑肌细胞myocardin mRNA表达在缺氧12、24 h后逐渐降低[(0.871±0.053)与(0.573±0.074)、(1.329±0.042),P<0.05]。缺氧12 h降低最明显。且随着缺氧时间的延长,myocardin基因的表达水平逐渐回升,并增高;缺氧24 h再复氧6 h后,其表达水平逐渐回升,复氧12 h接近正常表达水平。结论短期缺氧-复氧影响大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因的表达。