番茄斑萎病毒外壳蛋白原核表达及Dot-blot ELISA检测方法的建立

被引:17
作者
于翠 [1 ]
邓凤林 [2 ]
杨翠云 [1 ]
吴建祥 [2 ]
机构
[1] 上海出入境检验检疫局
[2] 浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所
关键词
番茄斑萎病毒; 原核表达; Dot-blotELISA方法;
D O I
暂无
中图分类号
S432.4 [侵(传)染性病害];
学科分类号
090401 [植物病理学];
摘要
将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)全长外壳蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中,经限制性酶切分析及测序结果表明插入方向正确且阅读框架无移码突变.将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析结果证实IPTG可诱导1个分子量约为48 kDa的融合蛋白表达.利用6×His标签单抗和TSWV FoPaTs1多抗证实所表达的蛋白为TSWV外壳蛋白.以纯化的重组外壳蛋白免疫小鼠,制备杂交瘤细胞培养上清单抗,并用杂交瘤细胞培养液上清建立了可靠、有效检测TSWV的Dot-blot ELISA方法.
引用
收藏
页码:597 / 601
页数:5
相关论文
共 4 条
[1]
Identification of a novel RNA silencing suppressor; NSs protein of Tomato spotted wilt virus.[J].Atsushi Takeda;Kazuhiko Sugiyama;Hideaki Nagano;Masashi Mori;Masanori Kaido;Kazuyuki Mise;Shinya Tsuda;Tetsuro Okuno.FEBS Letters.2002, 1
[2]
The detection of Tomato spotted wilt virus (TSWV) in individual thrips using real time fluorescent RT-PCR (TaqMan).[J].N. Boonham;P. Smith;K. Walsh;J. Tame;J. Morris;N. Spence;J. Bennison;I. Barker.Journal of Virological Methods.2002, 1
[3]
侵染烟草的番茄斑萎病毒(TSWV)电镜诊断鉴定 [J].
张仲凯 ;
方琦 ;
丁铭 ;
彭潞波 ;
张丽珍 .
电子显微学报, 2000, (03) :339-340
[4]
四川晒烟上发现番茄斑萎病毒(TSWV) [J].
姚革 .
中国烟草, 1992, (04) :2-4