原生质体制备是通过体细胞杂交或基因转导进行种质改良的基础。探讨了糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)原生质体制备及再生条件。用 MYG 培养菌丝,以甘露醇为稳渗剂,用1.5%溶壁酶 Lywallzyme 进行酶解脱壁,在菌龄7天、酶液 pH 值4.5、温度28℃、酶解4hr 的条件下原生质体产量最高(20×10~6/ml,0.01g 湿菌丝),其再生率大于8%,菌丝培养前对接种物进行予切碎处理可进一步使产量提高约2倍,而再生率并不显著下降。酶解液 pH 值为5.5和6.5时的原生质体产量低于 pH4.5,但再生率有所提高。