番茄果实特异性E8启动子的基因克隆与序列分析

被引:26
作者
周晓红
陈晓光
张晓东
王亚楠
李林
习佳飞
胡建军
机构
[1] 第一军医大学寄生虫学教研室,第一军医大学寄生虫学教研室,北京市农林科学院生物技术研究中心,第一军医大学学员一旅五队,第一军医大学学员一旅五队,第一军医大学学员一旅五队,第一军医大学学员一旅五队广东广州,广东广州,北京,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州
基金
广东省自然科学基金;
关键词
番茄; 果实特异性E8启动子; 基因克隆;
D O I
暂无
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
摘要
目的获取番茄果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因番茄中果实特异性表达做准备。方法培养中蔬5号(Zhongshu No.5)番茄幼苗, 采集叶片,用Omega公司的植物基因组提取试剂盒提取番茄基因组DNA;设计引物,从基因组中通过PCR扩增获得番茄果实特异性E81.1和E82.2启动子基因;克隆进pGEM-T载体,酶切鉴定;送上海基康公司测序;序列分析。结果从番茄基因组DNA中PCR扩增得到预期大小的启动子片段;构建重组pGEM-T-E81.1和pGEM-T-E82.2载体,经酶切证实具有与目标片段长度相符的插入片段;测序结果分析显示:番茄果实特异性E8启动子序列高度保守,所获得的Zhongshu No.5 E82.2启动子DNA序列与Deikman报道的Cherry种的E82.2启动子同源性为99%, 登陆GenBank, ID号为AF515784。结论成功获得Zhongshu No.5番茄果实特异性E81.1、E82.2启动子基因,为下一步转基因番茄口服疫苗的研制奠定了一定的工作基础。
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