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治疗型双质粒HBV DNA疫苗的构建及其鉴定
被引：17
作者：
何晓嫱
陈光明
黄英
杨富强
吴乐园
莫国玉
机构：
[1] 解放军第医院全军肝病研究中心
[2] 解放军第医院全军肝病研究中心 广州
[3] 广州
来源：
基金：
国家高技术研究发展计划(863计划);
关键词：
疫苗,DNA;
肝炎病毒,乙型;
治疗型HBVDNA疫苗;
D O I：
暂无
中图分类号：
R392 [医学免疫学];
学科分类号：
100108 [医学免疫学];
摘要：
为构建以人白细胞介素 2 /γ干扰素(hIL 2 /hIFN γ)融合基因为佐剂的治疗型HBVDNA疫苗 ,采用DNA重组技术分别构建含有HBV包膜中蛋白 (preS2 ·S)抗原和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白的真核表达质粒即pcDNAS2 ·S和pcDNAIIF ,酶谱和测序分析表明克隆的preS2 ·S和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白基因片段的方向、序列与预期相符。用脂质体转染试剂转染COS 7细胞 ,并用ELISA检测转染细胞培养上清中目的基因表达水平。结果显示 ,质粒转染后 4 8h达峰值 ,分别为HBsAg(P/N) =7.6 3、IL 2 =1 0 .35ng/ml、IFN γ =7.90ng/ml。以CTLL 2依赖细胞株/MTT比色法和微量细胞病变抑制法 (WISH VSV)检测pcDNAIIF转染后 4 8h培养上清中IL 2及IFN γ活性 ,结果分别为 998U/ml和 2 4 9U/ml。证明构建的重组质粒pcDNAS2 ·S和pcDNAIIF结构正确 ,在体外转染细胞其质粒得到分泌表达并保留生物学活性
引用
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页码：493 / 497
页数：5
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