N-V蛋白酶含量检测方法的准确度评价

目的:采用多种方法测定N-V蛋白酶含量,并比较实验结果,选择出最适合N-V蛋白酶含量测定的方法。方法:从沙蚕体内提取的N-V蛋白酶,以凯氏定氮法为基准方法,采用考马斯亮蓝法、Lowry法和紫外吸收法测定N-V蛋白酶的含量。结果:考马斯亮蓝法得到N-V蛋白酶含量为(5.150±0.028)g.L-1,紫外吸收法(A280-A260)测得蛋白酶含量为(5.202±0.001)g.L-1,这两种方法均与凯氏定氮法测得的结果(5.164±0.013)g.L-1存在较小差异;Lowry法测得的结果为(1.12±0.014)g.L-1,明显偏低,存在较大差异。结论:凯氏定氮法、考马斯亮蓝法和紫外吸收法(A280-A260)均可测定出N-V蛋白酶含量。但N-V蛋白酶不适合采用Lowry法进行测定。