目的:建立HPLC同时测定土茯苓药材中落新妇苷、黄杞苷含量的方法。方法:采用HPLC法测定土茯苓中落新妇苷、黄杞苷的含量。Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-磷酸-水(20∶0.025∶80)为流动相,柱温为室温,流速为1.0mL.min-1,检测波长为290nm。结果:落新妇苷在0.233~1.846μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 9,n=8),平均回收率为98.62%(RSD为1.33%);黄杞苷在0.040 2~0.160 8μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 9,n=7),平均回收率为103.36%(RSD为1.69%)。结论:该测定方法精密度高,重复性好,快速,准确,灵敏,可用于土茯苓药材的质量控制。