玉米细菌性枯萎病菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立

被引:19
作者
漆艳香
朱水芳
赵文军
肖启明
廖晓兰
机构
[1] 湖南农业大学
[2] 国家质检总局动植物检疫实验所
[3] 湖南农业大学 长沙 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
[4] 儋州
[5] 北京
[6] 长沙
关键词
TaqMan探针; 实时荧光PCR; 玉米细菌性枯萎病菌; 检测; 鉴定;
D O I
10.13802/j.cnki.zwbhxb.2004.01.009
中图分类号
S435.13 [玉米病虫害];
学科分类号
090401 ; 090402 ;
摘要
成功建立了玉米细菌性枯萎病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。该方法根据细菌16S rDNA序列的特异性,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变特异性探针,并对10种细菌菌株和5种植原体进行了实时荧光PCR。结果表明,只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光信号,而其它参考菌不产生荧光信号,检测的绝对灵敏度是14.2 fg/μl质粒DNA,比常规的PCR电泳检测高约100倍。整个检测过程只需2h,完全闭管,降低了污染的机会,无须PCR后处理。
引用
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