目的:研究内皮细胞内Ca2+。方法:应用共聚焦激光扫描显微镜术(CLSM)研究体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)胞浆内游离Ca2+变化。结果:5μmol/LFluo-3/AM恒温(37℃)孵育体外培养HU-VEC60min即可达到最佳负载效果,孵育时间的再延长只能增加背景染色,随着观察时间的延长荧光强度逐渐减弱,可能是荧光淬灭的结果。另外,胞浆内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)在整个细胞内的分布是不均匀的,其确切意义尚不清楚。结论:胞浆内游离Ca2+的标记需要适宜的条件,并尽早检测。Ca2+在细胞内的分布是不均匀的。