苦参碱诱导K562细胞分化的差异表达基因的研究

被引:8
作者
何於娟
蒋纪恺
张彦
刘小珊
马凌娣
欧一衡
涂植光
机构
[1] 重庆医科大学临床生化教研室
[2] 重庆医科大学附属第一医院血液科
[3] 重庆市永川市人民医院
[4] 重庆医科大学临床生化教研室 重庆
[5] 重庆
关键词
苦参碱; K562细胞; 诱导分化; 差异表达基因;
D O I
暂无
中图分类号
R733.7 [白血病];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的研究苦参碱诱导人红白血病K562细胞分化的分子机制。方法应用改良的mRNA差异显示逆转技术(DDRT-PCR)筛选苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因;对差异cDNA片段纯化、克隆、测序及Blast分析,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法验证。进一步对其中的未知差异cDNA片段采用North-ern杂交确定其转录本的大小及组织分布特性,进而充分利用多种生物信息学资源对差异片段进行结构和功能的预测。结果苦参碱诱导K562细胞前后存在明显的基因表达差异,筛选获得了17条差异条带。其中4个差异显著片段经RT-PCR验证后,在Genbank中分析,有3个为已知基因,1个可能为未知基因,暂命名为KH基因。Northern杂交证实KH基因转录本的大小为1.35kb,分布于正常人体脑组织中。结论苦参碱具有诱导K562细胞基因表达谱发生变化的作用,由苦参碱诱导的K562细胞分化是一个多基因参与的过程;KH基因可能是苦参碱作用K562细胞后表达量发生改变的未知基因,可能与细胞癌变有关。
引用
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共 5 条
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