人GDNF在原代培养的大鼠成纤维细胞中的表达

被引:3
作者
段德义
杨慧
赵春礼
于凤山
李淑婷
鲁强
徐群渊
机构
[1] 首都医科大学北京神经科学研究所!北京
[2]
基金
国家科技攻关计划; 北京市自然科学基金;
关键词
胶质细胞源性神经营养因子(GDNF); 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR); 基因重组表达; 大鼠;
D O I
10.16098/j.issn.0529-1356.2001.02.002
中图分类号
R341 [];
学科分类号
摘要
目的 研究人脑胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)在治疗神经系统疾病中的作用 ,克隆其前体蛋白 c DNA序列 ,并用于真核细胞表达。 方法 提取我国自建的脑胶质瘤 BT32 5细胞总 RNA,用逆转录 PCR法扩增 GDNF全长 c DNA并构建其真核表达载体 p CI- neo- GDNF,然后转染原代培养的成纤维细胞 ,免疫组织化学及原位杂交检测 GDNF在细胞中的表达。 结果 从国人脑胶质瘤细胞中扩增到 5 5 8bp的 GDNF全长 c DNA,并在GDNF转基因原代成纤维细胞中检测到重组 GDNF的转录和表达。 结论 克隆到的 GDNF全长 c DNA片段 ,可用于真核细胞表达 ;其转基因细胞脑内移植后应能治疗包括帕金森病在内的神经系统变性疾病。
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页数:5
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