GDNF对羟基自由基损伤的体外培养新生大鼠背根节神经元的作用

目的:通过运用体外培养·OH（羟基）自由基（Free radical FR）损伤的细胞模型,研究CDNF对损伤的背根节神经元的各种作用,并研究GDNF对神经元作用机理及检测方法。方法:采用原代培养的方法,用N1无血清培养基分离培养DRG神经元,然后用100μM FeSO4,50μM H2O2形成的·OH自由基作用20min,弃去培养液,再用无血清DF12培养基洗2次,最后加上含有GDNF的无血清培养基,继续培养24hrs。然后用MTT法检测反映细胞的活性OD值,胎盘蓝染色记数。细胞总蛋白测定以及形态学观察突起地生长状况。结果:（1）GDNF浓度为20μg/ml,10/μg/ml对·OH自由基损伤的背根节神经元活性及存活有促进作用。（2）细胞的总蛋白及DRG突起长度:实验组与对照组不明显,GDNF组与空白对照组不明显。结论:在正常无血清体外培养情况下GDNF对DRG神经元作用不明显,在·OH自由基损伤后,对细胞的活性,存活有明显的保护作用,而对总蛋白合成及突起的生长则没有明显的促进作用。