黄瓜花叶病毒香蕉株系衣壳蛋白转基因烟草的研究

被引:12
作者
李华平,胡晋生,范怀忠
机构
[1] 华南农业大学植保系,夏威夷大学植病系,华中农业大学植保系
基金
高等学校博士学科点专项科研基金;
关键词
黄瓜花叶病毒,香蕉株系,衣壳蛋白基因转化,表达与抗性;
D O I
10.13242/j.cnki.bingduxuebao.000976
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
构建了侵染香蕉的黄瓜花叶病毒(CMV)两个株系(BS和HI)的衣壳蛋白(CP)基因的植物表达载体,并通过农杆菌共培养法和基因枪法,分别将两个株系的CP基因转化入了两种烟草植株。其CP基因转化频率及植株再生率研究结果表明,农杆菌共培养法比基因枪法、土耳其烟比本生烟、农杆菌1:10倍稀释液比培养原液和1:100倍稀释液,具有更高的转化频率和植株再生能力。Southernblot和PCR一Southernbolt检测CP基因整合研究结果表明,在两株系CP基因转化的各12株烟草中,各有9株含有各自的CP基因。Northernbolt分析表明,在各7株转基因植株中,各有5株具有各自CP基因的mRNA的转录。DAS一ELISA检测表明,各5株转基因植株中都含有各自株系不等量表达的CP。用HI株系进行攻击接种表明,具有mRNA转录和翻译的两株系的各5株转基因植株都显示了较高的抗病水平。
引用
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