沉默HIF-2α表达对低氧下乳腺癌干细胞微球体富集的影响

被引:5
作者
屈洪波 [1 ]
范原铭 [1 ]
韩明利 [1 ]
陈鑫 [1 ]
吴诚义 [1 ]
汤为学 [2 ]
机构
[1] 重庆医科大学附属第一医院内分泌外科
[2] 重庆市神经病学重点实验室
关键词
低氧微环境; HIF-2α; MCF-7; 乳腺癌干细胞微球体;
D O I
暂无
中图分类号
R737.9 [乳腺肿瘤];
学科分类号
100214 [肿瘤学];
摘要
目的:探讨沉默低氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)表达对低氧下乳腺癌干细胞(breast cancerstem cells,BCSCs)微球体富集的影响。方法:构建HIF-2αRNA干扰慢病毒载体,并转染至MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot检测HIF-2αmRNA及蛋白表达;MTT检测MCF-7细胞在不同氧浓度下增殖活性;显微镜下观察低氧下BCSCs微球体形成情况;有限稀释法检测微球体细胞单克隆形成能力;RT-PCR检测微球体细胞干细胞相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达。结果:成功构建了HIF-2α基因siRNA慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot结果显示干扰组细胞HIF-2αmRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与未转染组及空载体组比较,低氧下RNA干扰组细胞增殖活性及BCSCs单克隆形成能力明显降低(P<0.05);RT-PCR结果亦显示RNA干扰组BCSCs相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:低氧能够诱导和强化MCF-7细胞乳腺癌癌干细胞样特性,而沉默HIF-2α表达可抑制低氧下BCSCs富集,提示HIF-2α有望成为乳腺癌治疗新的靶点。
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