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表达H9亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力
被引:25
作者:
程坚
刘秀梵
彭大新
刘红旗
机构:
[1] 扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室
[2] 扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室 扬州
[3] 扬州
来源:
关键词:
H9亚型禽流感病毒;
重组鸡痘病毒;
血凝素;
D O I:
10.13343/j.cnki.wsxb.2002.04.009
中图分类号:
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号:
090601 ;
摘要:
以RT PCR法扩增获得H9亚型禽流感病毒 (AIV)分离株 (A Chicken China F 1 998)的血凝素 (HA)基因 ,将其定向插入鸡痘病毒转移载体 1 1 75的痘苗病毒启动子P7 5的下游 ,得到重组转移载体 1 1 75HA。以脂质体转染法将 1 1 75HA转染至已感染鸡痘病毒 2 82E4疫苗株(wt FPV)的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,通过在含X gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rFPV HA。以间接免疫荧光法证实感染rFPV HA的CEF表达了HA。rFPV HA在免疫 7日龄SPF鸡 7天后即能诱生可检出的血凝抑制 (HI)抗体 ,1 4天后诱生的HI抗体到达高峰 ,且诱生的HI抗体保持较高水平达 5 5天。在 7日龄SPF鸡及含抗FPV母源抗体的商品鸡上进行的免疫效力试验表明 ,rFPV HV能显著抑制静脉攻毒后免疫鸡从泄殖腔的排毒 ,效果与AIV全病毒灭活苗相当。
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