甘蓝型油菜pep基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建

被引：14

作者：

张志刚

白德朗

陈烈臣

熊兴华

李栒

官春云

机构：

[1] 国家杂交水稻工程技术研究中心,国家杂交水稻工程技术研究中心,湖南农业大学期刊社,作物基因工程湖南省重点实验室,作物基因工程湖南省重点实验室,作物基因工程湖南省重点实验室湖南长沙作物基因工程湖南省重点实验室,湖南长沙,湖南长沙作物基因工程湖南省重点实验室,湖南长沙,湖南长沙,湖南长沙,湖南长沙,湖南长沙

来源：

湖南农业大学学报(自然科学版) | 2005年 / 03期

关键词：

甘蓝型油菜; PCR; 反义PEP; 种子特异性表达载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

S565.4 [油菜籽（芸薹）];

学科分类号：

090302 [植物营养学];

摘要：

丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到湘油15号中.

引用

页码：249 / 252

页数：4

共 7 条

[1]

甘蓝型油菜fad2基因片段的克隆和反义表达载体的构建 [J].