LC-MS和HPLC法测定人血浆中格列本脲和二甲双胍方法的建立

目的　建立人血浆中盐酸二甲双胍的高效液相色谱和格列本脲的液相色谱 质谱测定方法。方法　二甲双胍血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白进样。分析柱:EC 2 5 0 4 6NUCLEOSIL 10 0 5 (4 6mm×2 5 0mm ,5 μm) ;流动相:0 0 3mol L(NH4 )H2 PO4 ∶乙腈(75∶2 5 ,pH 7 0 ) ,流速1 0ml min ;检测波长2 40nm。格列本脲血浆中加入格列吡嗪为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC MS测定。色谱柱为ORBAXSB3 0 0C1 8柱(2 1mm×15 0mm ,5 μm) ,流动相为乙腈∶0 1%乙酸铵(5 5∶45 ) ,流速为0 2ml min ;ESI选择性正离子检测。结果　格列本脲浓度为2～2 0 0ng ml线性关系良好(r =0 9998) ,盐酸二甲双胍浓度为6 2 5～40 0 0ng ml线性关系良好(r =0 9999)。二甲双胍和格列本脲方法的日内和日间RSD <5 %。结论　所建立的人血浆中格列本脲的HPLC MS测定方法和二甲双胍的HPLC测定方法灵敏、准确、简便,可用于格列本脲、二甲双胍的人体药代动力学研究。