人骨髓间充质干细胞的体外培养及睫状神经节神经营养因子诱导其向神经元样细胞分化的研究附视频

被引:13
作者
赵书鹤
汤永红
周琼
机构
[1] 南华大学附属第二医院神经内科
关键词
骨髓间充质干细胞; 神经元; 睫状神经节神经营养因子; 碱性成纤维细胞生长因子;
D O I
暂无
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的探讨人骨髓间充质干细胞(h-MSCs)体外培养条件及睫状神经节神经营养因子(CNTF)对h-MSCs向神经元样细胞分化的影响。方法采用梯度离心法和全骨髓法相结合,利用含血清的DMEM/F12培养基培养h-MSCs,以碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24h后再以不同浓度CNTF诱导,传至第3代时h-MSCs开始向神经元样细胞方向分化。应用免疫细胞化学技术对培养细胞及其分化细胞进行鉴定。结果h-MSCs在体外培养条件下能保持旺盛的增殖能力,CNTF诱导后细胞形态发生明显改变,伸出突起,类似神经元;免疫细胞化学法检测显示CD44、CD54以及诱导后神经元特异性蛋白(NSE)和巢蛋白(nestin)均呈阳性表达。10ng/mL实验组NSE阳性细胞占细胞总数的(42.42±1.39)%,nestin阳性细胞占细胞总数的(45.36±1.60)%。结论h-MSCs可在体外扩增、培养。h-MSCs经bFGF预诱导后再经CNTF诱导可向神经元样细胞方向分化。10ng/mL为CNTF的最适诱导浓度。
引用
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页码:159 / 162+229 +229
页数:5
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