柽柳MnSOD基因的克隆及功能验证

根据已克隆得到的柽柳MnSOD基因片段,采用RACE技术从柽柳中获得MnSOD的cDNA全长序列。该基因全长为1087bp。其中,5'非编码区40bp,3'非编码区333bp,开放读码框(ORF)长699bp,编码232个氨基酸。分子量为26KD,等电点为7.10。该MnSOD氨基酸序列与拟南芥MnSOD序列同源性最高为83%,从12个物种的序列比对可以看出MnSOD氨基酸序列保守性较高。该序列的Genbank注册号为AY573576(基因)和AAS77885(蛋白)。将MnSOD基因与酵母表达载体pYES2连接,并进一步转化到酵母基因组中。对重组酵母INVSc1(pYES2-SOD)和对照INVSc1(pYES2)进行干旱、高温胁迫实验。结果表明:重组酵母的抗干旱、高温能力明显高于对照,证实了来源于柽柳的MnSOD基因具有抗干旱和耐高温能力。