土壤微生物RAPD分析体系的优化研究

被引：13

作者：

焦晓丹

吴凤芝

高海军

机构：

[1] 东北农业大学园艺系

[2] 建三江大兴农场哈尔滨

[3] 哈尔滨

[4] 建三江

来源：

生态学杂志 | 2005年 / 08期

基金：

黑龙江省自然科学基金;

关键词：

土壤微生物; RAPD反应体系; 优化;

D O I：

10.13292/j.1000-4890.2005.0069

中图分类号：

S154.3 [土壤微生物学];

学科分类号：

071012 ; 0713 ;

摘要：

采用正交实验设计,对影响土壤微生物RAPD扩增体系的Mg2+、dNTP浓度及引物浓度进行了研究,同时对退火温度、延伸时间及循环次数进行摸索。结果表明,适宜土壤微生物PCR扩增反应在25μl体积中进行,包括7ng土壤微生物DNA样品、20pm随机引物l、.5uTaq酶、3.0mmol.L-1Mg-CL2和0.2mmol.L-1dNTP。PCR扩增反应进程如下:94℃3min,使土壤DNA变性;然后再进行39个循环,每个循环包括94℃1min,37℃40s,72℃90s,结束后72℃延伸7min。

引用

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