减毒沙门菌运送的H9N2亚型禽流感病毒DNA疫苗的研制及其免疫试验

被引:11
作者
刘丽平
焦新安
张小荣
潘志明
机构
[1] 扬州大学兽医学院
关键词
减毒沙门菌; DNA疫苗; H9N2亚型禽流感病毒; 免疫效力;
D O I
10.16437/j.cnki.1007-5038.2007.09.028
中图分类号
S852.5 [血清学];
学科分类号
090604 [动物药学];
摘要
根据GenBank中已发表的H9N2亚型AIV HA基因序列设计并合成一对PCR引物,通过RT-PCR扩增A/Chicken/Shanghai/3/2002(H9N2)AIV毒株的HA基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1和asd-pVAX1得到重组表达质粒pVAX1-HA和asd-pVAX1-HA。将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实,HA基因在细胞内得到了瞬时表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门菌SL7207和X4550,得到两种运送DNA疫苗的重组沙门菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)。以5×109cfu/只的剂量两次口服接种1日龄的商品代伊莎褐蛋鸡,免疫鸡既能检测到HA特异性的血清抗体应答,又能检测到黏膜免疫应答,采用A/Chicken/Shanghai/3/2002(H9N2)AIV毒株经滴鼻和口服同时攻毒免疫鸡后,这两种疫苗抑制免疫鸡排毒的效果与灭活疫苗有显著差异。
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共 5 条
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