定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究

被引：12

作者：

曲识 ^{[1
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史清海 ^{[1
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何宁 ^{[2
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陈永胜 ^{[4
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周蕾 ^{[1
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郭兆彪 ^{[1
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周冬生 ^{[1
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翟俊辉 ^{[1
]}

杨瑞馥 ^{[1
]}

机构：

[1] 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

[2] 公安部消防局

[3] 北京科技大学土木与环境工程学院

[4] 上海市消防总队特勤支队

来源：

军事医学科学院院刊 | 2010年 / 34卷 / 03期

关键词：

炭疽芽孢杆菌; 实时荧光定量PCR; TaqMan探针;

D O I：

暂无

中图分类号：

R440 [];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的建立一种简便、快速、定量检测炭疽芽孢杆菌的PCR方法。方法采用TaqMan荧光探针技术,针对炭疽芽孢杆菌质粒pXO1、pXO2上的基因设计引物;用炭疽芽孢杆菌(Sterne株)污染环境土壤来模拟实际样本,比较了从土壤中提取DNA的不同方法对检测效果的影响,并与同类进口试剂进行了平行比对。结果以含有检测目的片段的线性质粒为模板,反应体系的灵敏度可达到101拷贝/μl;用Sterne株芽孢悬液污染土壤,检测灵敏度可达2.5×103cfu/g土壤。我们研制的试剂与进口试剂在敏感性和准确性方面一致,且操作简便。结论本研究建立的炭疽芽孢杆菌实时定量PCR检测方法可特异、灵敏地检测土壤标本中可疑目标菌。

引用

页码：275 / 279

页数：5

共 13 条

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