豇豆蛋白酶抑制剂基因转化毛白杨的研究

被引:69
作者
郝贵霞
朱祯
朱之悌
机构
[1] 中国科学院遗传研究所!北京,中国科学院遗传研究所!北京,中国科学院遗传研究所!北京
关键词
毛白杨; 根癌土壤杆菌; 转化; 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因; 转基因植株;
D O I
暂无
中图分类号
S188 [农业生物工程];
学科分类号
071007 ; 0828 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
利用根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)介导法将广谱抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因导入毛白杨 (PopulustomentosaCarr.) 12 85雌株和毛新杨 (P .tomentosa×P .bolleana)×毛白杨回交杂种 ,比较了不同卡那霉素 (Km)浓度和Km选择压力的施加方式对毛白杨芽的再生过程和转化频率的影响 ,经过严格筛选获得了大量转基因株系。对所获得的转基因株系从试管苗继代能力、叶片再生芽能力和嫩茎生根能力 3个指标进行了卡那霉素抗性 (Kmr)鉴定 ,将Kmr 植株初步确定为转基因植株。对部分Kmr 植株进行了分子检测 ,PCR鉴定和PCRSouthern检测证实 ,CpTI基因已整合进杨树基因组中。CpTI抑制活性检测表明 ,大部分转基因株系都对胰蛋白酶有一定的抑制活性 ,对照未转化植株没有抑制活性。
引用
收藏
页码:1276 / 1282
页数:7
相关论文
共 8 条
  • [1] FactorsinfluencingthetissuecultureandtheA grobacteriumtumefaciens_mediatedtransformationofhybridas penandpoplarclones. DeBlockM. Plant and Physiology . 1990
  • [2] RegenerationoftransgenicplantsfromthecommercialapplecultivarRoyalgala. YaoJL,CohenD,AtkinsunR,RichardsonK,MorrisB. Plant Cell Reports . 1995
  • [3] GenetictransformationofstrawberrybyAgrobacteriumtumefaciensusingaleafdiskregenerationsystem. NehraNS,ChibbarRN,KarthaKK,DatlaRSS,CrosbyWL. Plant Cell Reports . 1990
  • [4] Thepreparationandpropertiesoftwonewchromogenicsubstrateoftrypsin. ErlangerBF,KokowskyN,CohenW. Archive of Biochemistry and Biophysics . 196 1
  • [5] Anovelmechanismofinsectresistanceengineeredintotobacco. HilderVA,GatehouseAMR,SheermanSE,BarkerRF,BoulterD. Nature . 1987
  • [6] Constitutiveexpressionofatrypsininhibitorgene,CpTI,intransgenicriceplantsconfersresistancetotwomajorriceinsectpests. XuD,XueQ,McElroyD,MawalY,HilderVA,WuR. Molecular Breeding . 1996
  • [7] Arapidandsensitivemethodforthequantifica tionmicrogramquantitiesofproteinutilizingtheprinciplepro teindyebinding. BradfordMA. Analytical Biochemistry . 1976
  • [8] Stabletransforma tionofPopulusandincorporationofpestresistancebyelectricdischargeparticleacceleration. McCownBH,McCabeDE,RussellDR. Plant Cell Reports . 1991