豇豆蛋白酶抑制剂基因转化毛白杨的研究

利用根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens （SmithetTownsend）Conn)介导法将广谱抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂 （CpTI）基因导入毛白杨 （PopulustomentosaCarr.） 12 85雌株和毛新杨 （P .tomentosa×P .bolleana）×毛白杨回交杂种 ,比较了不同卡那霉素 （Km）浓度和Km选择压力的施加方式对毛白杨芽的再生过程和转化频率的影响 ,经过严格筛选获得了大量转基因株系。对所获得的转基因株系从试管苗继代能力、叶片再生芽能力和嫩茎生根能力 3个指标进行了卡那霉素抗性 （Kmr）鉴定 ,将Kmr 植株初步确定为转基因植株。对部分Kmr 植株进行了分子检测 ,PCR鉴定和PCRSouthern检测证实 ,CpTI基因已整合进杨树基因组中。CpTI抑制活性检测表明 ,大部分转基因株系都对胰蛋白酶有一定的抑制活性 ,对照未转化植株没有抑制活性。