应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒(英文)

被引:5
作者
张寿斌
廖华
黄呈辉
谭庆瑜
张炜灵
陈侃
机构
[1] 广东省深圳市宝安区人民医院儿科
[2] 深圳市宝安中心血站分子生物学研究室
[3] 广东省深圳市宝安区人民医院儿科 广东深圳
[4] 广东深圳
关键词
逆转录聚合酶链反应; 肠道病毒; 通用引物;
D O I
暂无
中图分类号
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号
100208 ;
摘要
目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛。特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及165例可疑EV感染的327份临床标本进行检测。结果EV标准株均在电泳中检测到一清晰312bp扩增条带,而非EV标准株则无扩增条带;共有104份标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%;147例病例同时检测了粪便和咽拭子,粪便阳性49例,咽拭子阳性44例,其中粪便和咽拭子同时阳性35例,粪便和咽拭子EV阳性比较无显著性差异(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%。结论RT-n-PCR可以准确地检测出肠道病毒,特异性强,用时少,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。
引用
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共 3 条
[1]  
Medicalmolecularvirology. JINQ. . 2001
[2]  
Detectionandrapiddifferentiationofhumanenterovirusfollowinggenomicamplification. KUANMM. J.ClinMicrobiol . 1997
[3]  
Generalprimer-mediatedpolymerasechainreactionfordetectionofenteroviruses:Applicationanddiagnosticroutineandpersistentinfections. ZollGJ,MelchersWJ,KopeckaH,etal. JCliMicrobiol . 1992