Wistar大鼠成骨细胞体外分离、培养及初步研究

目的　研究体外分离、培养的Wistar大鼠成骨细胞的生物学物性。　方法　取Wistar大鼠双侧股骨 ,用胰酶冷热交替消化法收集细胞 ,以 1× 10 6 ml的细胞浓度培养 ,2周后得到贴壁生长的单层细胞。随后进入传代培养 ,通过倒置显微镜观察、HE染色、碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原检测等手段对所获得的细胞进行生物学特性研究。　结果　获得的细胞呈多种形态 ,有长短不一、粗细不均 ,互相连接的胞浆突起 ,细胞互相重叠呈复层生长 ,并形成细胞结节。细胞经连续传代 ,形态与功能不变。细胞富含碱性磷酸酶活性 ,Ⅰ型胶原染色阳性 ,这与典型成骨细胞的生物学特性相似。　结论　用骨组织在体外能培养出成骨细胞 ,可作为骨组织工程体外构建的种子细胞。