麦迪霉素产生菌具有启动功能的DNA片段的克隆和分析

被引：2

作者：

金红

王以光

机构：

[1] 中国医学科学院、中国协和医科大学医药生物技术研究所

来源：

微生物学报 | 1994年 / 06期

关键词：

链霉菌启动子; 启动子探针质粒载体; 麦迪霉素产生菌;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.1994.06.001

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

利用启动子探针质粒载体pIJ486从麦迪霉素产生菌总DNA中克隆得到了一段具有启动功能的DNA片段.通过限制性酶酶切分析,测定插入DNA片段大小为2.3kb.又利用载体pIJ486和pIJ487的新霉素抗性结构基因上游有多酶切点方向相反的性质,分析了插入片段在两个不同方向上的启动能力.结果表明,在两个方向上均有启动功能,但强弱相差六倍.其中在XbaI-HindIII方向上具有较强的启动能力,在变铅青链霉菌中新霉素抗性水平可达20mg/ml以上.进一步对插入片段的三个BamHI小片段进行分析的结果表明,较强启动子区域集中在BamHI-BamHI 0.79kb DNA片段上.

引用

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