PCR结合索氏转移杂交在结核病诊断中的应用

利用Ｈｅｒｍａｎｓ引物扩增插入序列ＩＳ９８６所得之２４５ｂｐ片断是一结核分支杆菌复合体特异性片断，采用随机引物法将地戈辛标记该片断。将纯化结核分支杆菌ＤＮＡ经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，索氏转移后与该探针杂交，检测灵敏度可达１ｆｇＤＮＡ。通过对７９例痰标本、１４例结核性胸腔积液及２６例结核性关节腔积液的ＰＣＲ和ＤＮＡ索氏杂交试验比较，认为采用２４５ｂｐ探针，将ＤＮＡ索氏转移杂交与ＰＣＲ体外扩增相结合，不仅提高了结核病基因诊断的敏感性，同时也提高了诊断的特异性。