富硒黄芪皂苷对IL-1β诱导大鼠退变软骨细胞mTOR信号通路的影响

被引:10
作者
颜春鲁 [1 ]
安方玉 [2 ]
金华 [3 ]
李嘉进 [1 ]
李孟翰 [1 ]
王国文 [4 ]
邓婕 [4 ]
张金龙 [4 ]
郭丹 [4 ]
彭霞 [5 ]
机构
[1] 甘肃中医药大学中医临床学院
[2] 甘肃中医药大学教学实验实训中心
[3] 甘肃中医药大学公共卫生学院
[4] 甘肃中医药大学第一临床医学院
[5] 甘肃中医药大学中西医结合学院
关键词
富硒黄芪皂苷; 退变软骨细胞; mTOR信号通路;
D O I
暂无
中图分类号
R285.5 [中药实验药理];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的探讨富硒黄芪皂苷对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠退变软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白、磷酯酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B (protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(microtubulerassociated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ) m RNA表达的影响。方法体外退变软骨细胞模型的建立用IL-1β(10 ng/m L)诱导,模型组和富硒黄芪皂苷治疗组分别给予DEME培养基和富硒黄芪皂苷干预(25~300 mmol/L),另外将第3代培养48 h的软骨细胞作为正常对照组,给予DEME培养基干预24、48、72 h。应用噻唑蓝(MTT)法检测各组软骨细胞的增殖能力,运用免疫组化法观察各组软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达变化,运用RT-PCR法检测各组软骨细胞PI3K、Akt、mTOR、Beclin-1和LC3-Ⅱ的基因表达变化。结果正常对照组、模型组和100 mmol/L富硒黄芪皂苷治疗组的Ⅱ型胶原蛋白表达水平分别为2 347.85±179.23,1 547.27±261.79和3 575.46±287.56; 3组的PI3K基因表达水平分别为1.00±0.03,2.75±0.02和1.14±0.01; 3组的Akt基因表达水平分别为1.00±0.04,1.83±0.07和1.13±0.04; 3组的mTOR基因表达水平分别为1.00±0.02,2.12±0.04和1.52±0.03; 3组的Beclin-1基因表达水平分别为1.02±0.02,0.61±0.03和0.90±0.02; 3组的LC3-Ⅱ基因表达水平分别为0.97±0.02,1.24±0.01和1.05±0.04。与正常对照组比较,模型组退变软骨细胞的增殖能力在24、48、72 h均减弱,且其Ⅱ型胶原蛋白的表达和Beclin-1基因表达在48 h下降,而模型组退变软骨细胞PI3K、Akt和mTOR基因表达在48 h则增强(P <0.05)。与模型组比较,富硒黄芪治疗组退变软骨细胞增殖能力在24、48、72 h均增强,但以48 h的100 mmol/L富硒黄芪皂苷的差异最显著,同时其Ⅱ型胶原蛋白的表达和Beclin-1基因表达也升高,而100 mmol/L富硒黄芪则使PI3K、Akt和mTOR基因表达降低(P<0.05)。结论富硒黄芪皂苷延缓及控制骨关节炎进展的可能机制与调控mTOR信号通路有关。
引用
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