新型Taq Man-MGB探针实时荧光定量PCR检测人类mdr1基因

被引:8
作者
邹亚伟 [1 ]
封志纯 [2 ]
胡斌 [3 ]
乔英飒 [3 ]
吴梓梁 [1 ]
陈福雄 [1 ]
叶铁真 [1 ]
机构
[1] 广州医学院第一附属医院儿科
[2] 南方医科大学珠江医院儿科
[3] 中山大学达安基因诊断中心
关键词
Taq Man-MGB探针; 实时荧光定量PCR; mdr1;
D O I
暂无
中图分类号
Q987-33 [];
学科分类号
071007 ;
摘要
目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量PCR检测新方法。方法用Primer Express 2.0引物设计软件设计引物和MGB探针,以Taq Man-MGB探针技术为基础,运用Taq Man-MGB探针,以含有目的基因mdr1cDNA的质粒pHaMDR1/A为阳性模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果所建立方法的最低检测限度为15个基因拷贝/反应,在待扩增DNA浓度为3.061×103 cps/ml-3.061×109cps/ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,决定系数r2为0.988243。结论应用Taq Man-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确性高等优点。
引用
收藏
页码:466 / 468
页数:3
相关论文
共 5 条
[1]   质粒DNA快速提取法在基础课实验中的应用 [J].
赵素然 ;
祁忠占 ;
白艳玲 .
实验技术与管理, 2005, (09) :21-23
[2]   荧光定量PCR技术在肿瘤研究中的应用 [J].
陈文学 ;
陈岳青 ;
黄秀珍 .
医学分子生物学杂志, 2004, (05) :323-326
[3]   多药耐药基因在K562细胞诱导分化过程中的表达 [J].
房定珠 ;
廖清奎 ;
李丰益 ;
贾国存 ;
何璐璐 ;
毛咏秋 .
实用儿科临床杂志, 2004, (01) :44-46
[4]   探讨MDR1基因转染k562细胞的最适条件 [J].
王珊 ;
金先庆 ;
杨纯正 ;
齐静 .
中华小儿外科杂志, 2002, (06) :84-85
[5]  
(美)J.萨姆布鲁克(JosephSambrook),(美)D.W.拉塞尔(DavidW.Russell)著,黄培堂等译.分子克隆实验指南[M].北京:科学出版社,2002