ELISA法检测HBsAg影响结果的重要因素的分析

目的确定温育温度、时间和条件对定性酶联免疫吸附试验(ELISA)测定结果的影响,为临床检验提供最佳方案。方法温育温度分别设为37℃组和室温组。37℃组温育时间分别为45分钟、60分钟、75分钟、90分钟和120分钟。其中室温组温育中又分别采用振荡和静置两种条件,温育时间分别为45分钟、1小时、2小时和4小时。检测阴性血清和0.2、0.5、1、2、5 ng/ml HBsAg系列定值血清,观察这些条件下标本测定S/CO比值的差异。结果在同一温育温度下,所有被检血清的S/CO比值均随着测定温育时间的延长而增大,浓度越低表现越为明显,以0.2 ng/ml的样本,温育2小时的S/CO比值与温育1小时相比,均有明显的增加,0.2 ng/ml的样本由按CUT-OFF值判断为阴性而转为阳性。对照组阴性血清的S/CO比值在温育各时间则变化不大。室温组在振动状态下反应较之静止状态下的反应,S/CO比值均有明显增加。结论温育条件对ELISA测定结果有很大影响,尤其是弱阳性标本,由于温育条件不当会造成假阴性,增加传染机率。