利用改进的cDNA RDA技术分离胡萝卜(Daucus carota L.)体细胞胚根发育相关的基因

被引：6

作者：

刁丰秋

张雷

黄美娟

吴乃虎

机构：

[1] 中国科学院发育生物学研究所!北京,中国科学院发育生物学研究所!北京,北京大学生命科学学院!北京,中国科学院发育生物学研究所!北京

来源：

中国科学C辑:生命科学 | 2000年 / 01期

关键词：

胡萝卜; cDNA RDA; 胚根发育; 基因克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

071007 ; 090102 ;

摘要：

根据链霉亲和素与生物素之间的结合作用及磁性吸附分离的原理 ,发展出改进的cDNA代表性差式分析（representationaldifferenceanalysis ,RDA）技术 ,并用来检测在调控和解调控培养 1 2h的胡萝卜体细胞胚中特异表达的基因 .结果显示 ,在解调控 1 2h的胡萝卜体细胞胚中 ,存在 4条特异表达的cDNA片段 ,命名为NR1 ,NR2 ,NR3和NR4.将这些片段分别克隆在pBS噬菌粒载体中 .DNA序列同源性比较表明 ,片段NR3和NR4分别与植物的DnaJ和木质葡聚糖内转糖基化酶（xyloglucanendo_transglycosylase）的编码基因有很高的同源性 ,而片段NR2中有一段序列与LEA蛋白（lateembryogenesisabundantproteins）基因有一定的同源性 .NR1则可能来自新基因 .用3 2 P标记NR1作探针 ,与cDNA片段群体进行杂交证实 ,从解调控 1 2h的胡萝卜体细胞胚中克隆到一种与胚根发育相关的新基因序列 .Southern杂交表明 ,此基因在胡萝卜基因组中可能以单拷贝或低拷贝的形式存在

引用

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共 7 条

[1] 蔗糖调控培养对胡萝卜体细胞胚内源ABA水平的效应 [J].